2013年5月3日 星期五

Strep B Carrot Broth--- 跟著紅蘿蔔色信心滿滿確認GBS的存在





GBS增菌鑑定培養基 - Strep B Carrot Broth™


原理與介紹

Beta溶血性B群鏈球菌之特殊生物特性是會與澱粉(Starch)、消化蛋白質(Peptone)、血清、以及葉酸代謝路徑抑制物( folate pathway inhibitors)等受質反應產生橘色,紅色,或磚紅色的色素。因此添加這些物質的培養基可用以直接偵測並鑑定檢體中是否有Beta溶血性的B群鏈球菌存在。最早以澱粉血清為配方成分的培養基為Islam1977年所設計,近年來,改良自原始配方的Granada 平板培養基在臨床上証實可準確檢測並鑑定出Beta溶血性的B群鏈球菌,而由此也提供了B群鏈球菌與上述受質反應產生色素的基因與產生溶血素的基因有直接連結性的證據。臨床上,95.3%99.5%B群鏈球菌皆是Beta溶血會產色素的菌株。

在美國疾病管制局2010年新生兒B群鏈球菌疾病預防指導方針中建議可使用的Strep B Carrot Broth™ 是以Granada配方為基礎並添加輔助B群鏈球菌生長與產色因子的增菌選擇性液態培養基,不需要次培養於5%綿羊血豆胰蛋白脢培養基與後續鑑定即可能於最短六小時判定陽性培養鑑定結果。2005年由Schreckenberger et al.主持的八家聯合醫院臨床試驗發現Strep B Carrot Broth™的敏感性優於LIM Broth (97% vs. 93%)(5)。而根據美國疾病管制局發表於106屆美國微生物學會年會的評估,Strep B Carrot Broth™可百分之一百偵測不同血清型的beta溶血性B群鏈球菌(6)

臨床應用 

直接將篩檢B群鏈球菌的臨床生殖道與/或直腸檢體接種於已置入增菌紙錠的Strep B Carrot Broth中,並將其培養於35培養箱中。若發現培養基有橘色,紅色,或磚紅色的色素產生(下圖)即可直接判定檢體中有Beta溶血性B群鏈球菌存在。相較於傳統的LIM培養鑑定流程,使用Strep B Carrot Broth™可增加敏感性,簡化繁複的流程,並縮短鑑定報告的時間。

Strep B Carrot Broth™培養鑑定判讀方式
 
Reference

1.     Young, Uh et al. 1998. Serotypes and Biochemical Reaction Patterns of Group B Streptococci. Korean J. Clin. Path.; 18:386-390.
2.     Merrit, K. and Jacobs, N. 1978. Characterization and Incidence of Pigment Production by Human Clinical Group B Streptococci. J. Clin. Microbiol.; Vol. 8, No. 1, p. 105-107.
3.     Noble, M., Bent, J., West, A. 1983. Detection and identification of group B streptococci by use of pigment production. J. Clin. Path.; 36:350-352.
4.     CDC. Prevention of perinatal group B streptococcal disease. Revised guidelines from CDC, 2010.  MMWR 2010;59 (No. RR-10)
5.     Schreckenberger et al. 2005. Evaluation of Strep B Carrot Broth™ and LIM Broth Methods for Recovery of Group B Streptococci (GBS): Results of a Multi-Center Trial. A poster presentation at American Society for Microbiology, 105th General Meeting, Atlanta, GA.
6.     Facklam, R. et al. 2006. Evaluation of Accuracy of Strep B Carrot Broth™ in the Detection of Different Seryotypes of Group B Streptococci (GBS). A poster presentation at American Society for Microbiology, 106th General Meeting, Orlando, FL.

2013年5月2日 星期四

GBS Detect 讓您看到GBS

                          
培養基 - GBS DetectTM (原廠資訊連結)
臨床應用
Hardy Diagnostics GBS DetectTM用以次培養經過增菌培養基(StrepB Carrot BrothTM LIM Broth)培養後的懷孕婦女篩檢B群鏈球菌檢體,可誘發不溶血或微弱溶血B群鏈球菌產生β溶血,用以分離及偵測非溶血(γ-hemolytic)B群鏈球菌。

原理與介紹
早發性新生兒B群鏈球菌感染疾病有極高的致死率。針對懷孕3537週婦女篩檢培養B群鏈球菌為美國疾病管制局新生兒B群鏈球菌疾病預防指導方針中建議使用的標準方法。方針中建議必須使用Strep B Carrot Broth™LIM Broth作檢體的增菌培養以增加分離率。Strep B Carrot Broth™針對β溶血性的B群鏈球菌可產生肉眼可見的顏色而可直接鑑別GBS的存在,不需另行操作鑑定試驗,可增加β溶血性的B群鏈球菌檢出率,並簡化鑑定流程。但無論使用可產色的Strep B Carrot Broth™或是傳統的LIM Brothγ溶血性B群鏈球菌由於在一般的含綿羊血平板培養基生長不會產生溶血,因此不易與其它小型不溶血的菌落區別,容易被錯失挑取,向來為實驗室人員的挑戰之一。

Hardy Diganostics GBS DetectTM 平板培養基除添加選擇性配方可抑制大腸桿菌群,葡萄球菌,以及其它一般常在菌的的生長外,另外含有溶血誘導因子,可引發微弱溶血或是不溶血的B群鏈球菌菌株產生強溶血反應。可減少篩檢γ溶血性B群鏈球菌的步驟,同時搭配Strep B Carrot Broth™ 應用可簡化B群鏈球菌篩檢流程,並增加所有B群鏈球菌的分離率。

臨床評估
1.    C- 101 Evaluation of GBS Detect and ChromID Strepto B agars for the detection of Group B streptococcus from GBS Screening Broth Medium (GBS)
Zarna A. Shah1 , Jessica D. Dolloff1, Sandy Tarleton1, and R. L. Sautter2
1Carolinas Laboratory Network, Charlotte, NC and 2Carolinas Pathology Group, Charlotte, NC
研究方法: 此研究以GBS DetectTM ChromID Strepto B agar分別進行116112個臨床檢體的試驗。另外300個檢體進行此二種培養基的平行比較,以包含PCR鑑定的兩法皆為陽性的結果為標準。
結果:應用GBS DetectTM116個檢體臨床評估檢出率為38.79%,而採用ChromID Strepto B agar112個檢體臨床評估檢出率為24.11%300個平行比較的檢體以標準法判定共分離出B群鏈球菌57株,GBS DetectTM檢出55株,敏感性為96.49% (55/57),而ChromID Strepto B agar檢出27株,敏感性47.37%(27/57)
      



2.    C-135 Evaluation of GBS Detect™: a New Medium for the Detection of Non-Hemolytic Group B Strep in Subcultures of Carrot Broth™ and LIM Broth. Results of a Multi-Center Trial
R. Clasen*1, V. Cuna1, S. Dolan2, J. Bartos3, J. Spoerke4 , G. Peterson5, B. Peterson6, Mary Colson-Burns6, I. Yeung7, J. Hardy1
1*Hardy Diagnostics, Santa Maria, California, 2Bethesda Oak Hospital, Cincinnati, Ohio, 3Aurora Health Care, Milwaukee, Wisconsin, 4Columbia -St. Mary’s, Milwaukee, Wisconsin, 5Central Coast Pathology, San Luis Obispo,
California, 6Allina Laboratories, Abbott-Northwestern Hospital, Minneapolis, Minnesota, 7Kaiser Berkeley Central Laboratory, Berkeley, California.

研究方法: 六家使用LIM BrothStrepB Carrot BrothB群鏈球菌增菌培養的醫院,自2007年十一月至20084月共收檢619個檢體,檢體經增殖後,次培養於BAPGBS DetectTM培養基上。懷疑為GBS的菌落以CAMP法或乳膠凝集試驗進行鑑定。
結果: 619個臨床檢體共檢出GBS 107株,在BAPGBS DetectTM上皆分離出的GBS83(占全部分離出菌株之77.5%[83/107]),僅在GBS DetectTM上分離出的GBS24(占全部分離出菌株之22.4%[24/107])。沒有GBS是只在BAP上被分離出來的。




產品圖樣


Reference
1.     Illumigene GBS: A Novel New Molecular Approach for the Detection of Group B Streptococcus, Jodi Wince, ASM 2011, http://m.core-apps.com/TriStar-ASM2011/abstract/84dc19e6de1adf2c66b74fa 54f6cf5d8, accessed 4/9/12
2.     Crystal J. Redfern, MT (ASCP); Robert L. Sautter, PhD, HCLD (ABB), Near-Patient Testing for Group B Streptococci Screening. Point of Care: T he Journal of Near-Patient Testing & Technology: Volume 8(1)March 2009 pp 25-28
3.     2010 Guidelines for the Prevention of Perinatal Group B Streptococcal Disease http://www.cdc.gov/groupbstrep/guidelines/guidelines.html,accessed 4/9/12
4.     EVALUATION OF THE ILLUMIGENE GBS METHOD, HARDY DETECT AND G BS CHROME AGARS FOR THE DETECTION OF GROUP B STREPTOCOCCUS FROM GBS BROTH Jessica D. Dolloff1, Zarna A. Shah1, and R. L. Sautter2 1Carolinas Laboratory Network, Charlotte,